【摘要】目的：基于网络药理学和药效学实验探讨雷公连水提物对病理性心肌肥厚治疗作用。方法：通过SwissADME和SwissTargetPrediction数据库筛选活性候选靶标对应基因；使用软件Cytoscape3.9.1形成“活性物质-疾病靶点”网络；使用String数据库创建靶蛋白互相作用网络；在David数据库进行GO分析和KEGG分析。采用CCK-8方法检测细胞存活率；蛋白免疫印迹法Western Blot检测细胞中心肌肥厚标志物蛋白ANP表达水平；RT-PCR检测ANP、IL-6和RelA表达水平。结果：通过液质结果出雷公连水提物中化学成分62个，经筛选后得到雷公连水提物中的有效成分为，31个，网络药理学预测出与心肌肥厚疾病的共同靶点共70个。在KEGG富集分析结果预测出Metabolic pathways通路（P值最小，Count值最大）的信号通路。雷公连水提物能有效治疗病理性心肌肥厚。RT-PCR检测结果和Western Blot检测结果都显示，雷公连水提液能够抑制ANP、IL-6和RelA表达水平。结论：雷公连水提物对ISO诱导心肌肥厚具有一定的保护作用。
【关键词】雷公连；心肌肥厚；网络药理学
目录
【摘要】6
【Abstract】7
第1章文献综述8
1.民族药雷公连的研究进展8
1.1雷公连概述8
1.2雷公连的药效作用8
1.3雷公连的药效成分8
2.网络药理学研究进展8
2.1网络药理学概述8
2.2网络药理学的发展与重要意义8
2.3网络药理学研究方法9
2.4网络药理学在中药治疗病理性心肌肥厚中的应用9
3.中医药治疗病理性心肌肥厚的研究进展9
3.1病理性心肌肥厚的概述9
3.2病理性心肌肥厚的发病机制10
3.3中医临床的病理性心肌肥厚研究10
3.4中医药抗病理性心肌肥厚的研究前景11
第2章基于网络药理学探究雷公连与病理性心肌肥厚之间的相关性12
1.网络数据库及软件12
2.雷公连化学成分收集与筛选12
3.雷公连活性候选靶标对应基因的收集12
4.心肌肥厚相关靶标基因的收集12
5.“活性成分-作用靶点”网络构建与分析12
6.靶蛋白互相作用网络图构建（PPI）13
7.GO富集及KEGG通路分析13
8.实验结果13
8.1雷公连活性候选靶标对应基因的收集13
8.2雷公连活性成分治疗心肌肥厚相关靶标13
8.3“活性成分-作用靶点”的网络构建14
8.4靶蛋白互作网络图（PPI）15
8.5雷公连中靶标基因GO富集分析15
8.6雷公连治疗心肌肥厚关键靶点KEGG通路富集分析17
第3章药效学实验验证18
1.蛋白免疫印迹Western Blot试验23
1.1实验材料23
1.2 Western Blot试剂配制24
1.3实验方法27
1.4统计学分析30
2.实时荧光定量Real time RT-PCR 30
2.1实验仪器与试剂30
2.2实验方法30
2.3统计方法32
3.细胞毒性18
3.1实验细胞18
3.2实验试剂18
3.3实验仪器18
3.4实验方法18
3.5目的蛋白检测21
4.结果32
4.1 CCK8法检测雷公连水提物对H9c2细胞存活率的影响32
4.2雷公连水提物对ANP表达的影响33
4.3雷公连水提物对RelA表达的影响33
4.4雷公连水提物对IL-6表达的影响34
5.讨论35
6.结论35
【参考文献】36
致谢38
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