摘要
宿主的先天免疫系统中含有一种重要成分叫做抗菌肽,抗菌肽可以经过人工合成和试验设计所制备。并且抗菌肽因具有优良的理化性质如抗菌谱性质广、耐高温、不易形成耐药性,还可以肠道菌群在维持动物机体健康方面具有重要意义。本文为研究抗菌肽制剂对仔猪生长性能及消化率的影响,试验将选择120只28日龄时体重接近7.5kg左右的健康的仔猪,随机分为四个处理,每组三个重复,每个重复10只仔猪。各组平均体重统计学分析差距不显著(P≥0.05),对照组为基础日粮,试验组A为基础日粮+50mg/kg抗菌肽制剂,试验组B为基础日粮+100mg/kg抗菌肽制剂,试验组C为基础日粮+150mg/kg抗菌肽制剂,控制其余变量,并做好观察试验组与对照组的粪便标准情况,每隔10天测量仔猪的体重情况并如实记录,经数据采集并统计分析后,结果表明:末均重各试验组相比存在显著差异(P<0.05),料肉比各试验组相比均存在显著差异(P<0.05),仔猪的腹泻率各试验组相比均存在显著差异,最后试验结果表明,当在基础日粮中添加150mg/kg抗菌肽制剂时,对仔猪生长性能及消化率都能起到积极的促进作用。抗菌肽具有抗菌、抗炎、促生长等功能,与传统抗生素相比,它不易产生耐药性,被认为极具替代饲用抗生素的潜在价值。可提高仔猪的生长性能,以及影响仔猪的消化率。
关键词:抗菌肽制剂;仔猪;生长性能;消化率
1前言
随着抗生素的禁用,人们开始寻找一种新型绿色的饲料添加剂来代替抗生素。抗菌肽具有种类繁多、抗菌活性高、选择性好等优点被广泛应用于畜牧生产中。国内研究发现,在母猪基础饲料中加入天蚕素抗菌肽可以增加母猪窝产仔数、健仔数,减少死胎,而且与基础饲粮组比较,平均一头净增重增加,同时腹泻率降低。抗菌肽能显著增加奶牛的产奶量,并能有效地预防奶牛隐性乳房炎。抗菌肽不但能提高雏鸡的日增重、提高其免疫器官质量,还能提高其对病菌、病毒的吞噬能力。目前,抗菌肽已在医药、农业、科研等方面得到了广泛的应用,但在畜牧业生产中仍有许多问题:由于原料、工艺的不同,产品定位和效果也有很大的差别;因此,今后的研究还需要对抗菌肽的提纯、合成工艺、最佳添加剂量和时间、与其他饲料添加剂的协同效应等方面进行深入的探讨。国外研究发现,抗菌肽会使膜的通透性和能量状况发生变化,从而使膜的脱极化、呼吸和ATP水平急剧降低,从而使靶死亡。抗菌肽是一类具有生物活性的小分子多肽,它广泛存在于自然界的动植物和微生物中。抗菌肽可以促进畜禽的生产,提高畜禽的免疫功能,减少肠道炎症,促进肠道微生物的繁殖,提高肠道的健康;抗菌肽能有效地控制和消除应激效应;抗菌肽是一种低分子量的多肽类,具有很好的杀菌效果,不会引起耐药性,且一旦被投放到环境中,就会被分解,而且对环境没有任何的污染;总的来说抗菌肽作为一种饲料添加剂已成为各国研究的热点。
2材料与方法
2.1试验材料
2.1.1试验动物
试验所用仔猪为杜洛克仔猪120头,28日龄,7.5kg健康状况良好,试验在辽宁省某牧原养猪场进行。整个试验期为37天,预试期为7天,正验期为30天。
2.1.2试验仪器
表2.1试验仪器
2.1.3试验试剂
表2.2试验试剂
2.2试验方法
仔猪的基础育肥猪的基础饲粮参照XNRC(1998)猪的营养需要及实践经验配制,日粮配方见表2.3,试验采用的抗菌肽由山东省宝来利来生物工程股份有限公司生产。
表2.3日粮组成及营养水平
注:预混料为每千克饲粮提供铁80mg,锌80mg,铜5mg,锰3mg,硒0.25mg,碘0.14mg,维生素A2250I,维生素D220IU,维生素E16I,维生素K20.5mg,维生素B12mg,维生素B24.5mg,维生素B7mg,维生素B120.03mg,烟酸30mg,泛酸25mg,叶酸0.3mg,生物素0.2mg,维生素C20mg。
2.3试验设计
试验将选择96只28日龄时体重接近7.5kg左右的健康的仔猪,随机分为四个处理,每组三个重复,每个重复8只仔猪。在试验组A在基础日粮上添加50mg/kg的抗菌肽,试验组B在基础日粮上添加100mg/kg的抗菌肽,试验组C在基础日粮上添加150mg/kg的抗菌肽。在试验的第1天,第10天,第20天,第30天的08:30分别对每仔猪进行空腹称重,记录每仔猪全程的总采食量。同时,每天观察记录试验组和对照组的仔猪粪便消化情况。
2.4饲养管理
本试验在同一栋仔猪舍内进行,4个栏。进猪前,将仔猪舍打扫干净并彻底消毒。试验前,将仔猪进行为期7天的预试验处理,包括断奶适应、饲粮试验等。试验猪只早、中、晚各喂食1次,全天自由饮水。猪圈是一个封闭的且漏缝地板式猪圈。饲料、饮用水和免疫的管理是按照商业养殖场标准进行的。通过压舌式自动饮水器提供免费饮用水。每天都要对猪的养殖和粪肥质量进行严格的监测,并对温度进行严格的记录和控制。同时每天记录仔猪腹泻数和死淘数。
2.5样品采集与处理
2.5.1饲料样品
每个处理均匀取样品250g,贮存于冰柜4℃,进行饲料常规养分含量的测定(总能、干物质、粗蛋白质、粗脂肪)。
2.5.2粪料样品
试验30天当天每个重复随机采集4头猪的粪便样品,添加10%的盐酸,搅拌均匀,于-20℃贮存。采集的粪便样品于65℃干燥48小时,然后用40目筛碾碎,然后冷冻保存。利用内源指示剂(AIA)测定消化速率,利用AOAC(2000)测定饲料养分和粪便养分,用绝热氧弹热法测定总能量。
2.6指标检测
2.6.1生长性能的测定
计算公式见式(2.1)、(2.2)、(2.3)、(2.4)如下:
试验时,每天观察仔猪的精神状态、排粪情况和持续时间。在预喂食期的第五天,试验期的第14天和第30天的20:00不在供给饲料,但是照例用水,第二天早上对仔猪进行空腹称重,就可以得到开始和结束的重量。试验完成后,根据重复次数对剩余口粮进行加权,计算各组总摄入量、平均体重增加量(ADG)、平均每日摄入量(ADFI)、饲料重量比(F/G)和腹泻率。
平均日增重(ADG/g)=增重/(试验天数×试验猪头数)(2.1)
平均日采食量(ADFI/g)=耗料量/(试验天数×试验猪头数)(2.1)
料重比(F/G)=饲料消耗量/增重(2.3)
腹泻率=试验期腹泻仔猪头数/(试验仔猪头数×试验天数)×100%(2.4)
2.6.2仔猪腹泻指标
仔猪腹泻程度统计评分标准、计算方法见表2.4,计算仔猪试验天数0-30d的腹泻率。根据腹泻程度评分标准进行仔猪腹泻程度统评分,计算仔猪试验天数0-30d的腹泻率。
3结果与分析
3.1抗菌肽对仔猪生长性能的影响
由表3.1可知,各个处理组的初均重和平均日采食量不存在显著差异(P>0.05)。末均重试验组A、B、C与对照组相比分别增加了2.94%、5.79%、8.63%,各试验组相比均存在显著差异,试验组间差异显著(P<0.05),其中试验组C与其他两组相比增加最显著。试验期间,与对照组相比,试验组A、B、C平均日增重分别增加4.08%、8.06%、9.32%,各试验组相比均存在显著差异,试验组间差异显著(P<0.05),其中试验组C与其他两组相比平均日增重最多。试验组A、B、C料肉比与对照组相比分别降低了4.59%、9.63%、14.52%,各试验组相比均存在显著差异,试验组差异显著(P<0.05),其中试验组C与其他两组相比料肉比降低最为明显。
3.2抗菌肽对仔猪腹泻率的影响
从表3.2可以看出,根据仔猪腹泻程度评分标准来记录,仔猪在30天内的对照组与试验组在腹泻程度评分标准上不同等级的记录总和.
指标对照组试验组A试验组B试验组C
样本数/头30303030
腹泻率/%69.79±4.27D50.00±2.65C36.40±2.50B20.24±3.59A
试验组与对照组相比,仔猪的腹泻率分别降低了28.36%、47.84%、71.00%,且差异极显著(P<0.05)。
3.3抗菌肽对仔猪养分消化率的影响
抗菌肽对仔猪养分消化率的影响
项目对照组试验组A试验组B试验组C样本数/份30303030
干物质/%60.87±2.60Aa73.89±1.05Bb76.34±1.34Bc77.34±1.43Bc
粗蛋白质/%52.13±3.12A67.78±2.26B66.87±3.03B67.87±3.09B
粗脂肪/%62.35±0.15a64.72±0.31b63.61±0.25b64.12±0.21b
能量/%73.56±1.47A83.83±1.18B85.73±0.94B84.86±1.23B
由表3.4可知,与对照组相比,试验组的干物质消化率分别显著提高了21.39%、25.42%、27.06%(P<0.01),粗蛋白质的消化率分别显著提高30.02%、28.28%、30.19%(P<0.01),粗脂肪的消化率分别显著提高了3.80%、2.02%、2.83%(P<0.05),能量的消化率分别显著提高了13.96%、16.54%、15.36%(P<0.01)。抗菌肽对仔猪肠道微生物具有显著的改善作用,同时仔猪肠道微生物的存在影响仔猪营养物质的吸收,因此对仔猪营养物质的消化率产生影响。
4讨论
4.1不同水平抗菌肽对断奶仔猪生长性能的影响
近年来,我国大力发展新型饲料添加剂,以取代抗生素。在这些变化中,抗菌肽因其广谱、高效、耐药性低而受到广泛关注。本试验研究证明了抗菌肽作为一种潜在的饲料添加剂在仔猪营养中的作用。研究了抗菌肽对仔猪生长和消化的影响。
抗菌肽可以改善断奶仔猪的生长性能,这与Jin等人的结果一致[15]。在抗菌肽中加入乳酸对乳猪的生长发育无明显影响[16]。因此,抗生素可以提高营养素的表观消化率。结果:肠壁组织发生变化,肠上皮厚度及上皮的流动速率均有明显变化。另外,为了提高食物的表面消化能力,加入抗菌肽,可以通过调整肠道内的微生物平衡和促进粘膜的免疫系统。在生长阶段,脱脂仔猪的免疫系统是在有效免疫后4-5个星期内开始发育的。在断奶后的前两个星期里,小猪对疾病和应激反应十分敏感。这时,在断奶仔猪中,非特异性免疫对其生长和免疫的影响尤为明显,需要血清免疫球蛋白来调节和提高免疫力。它可以保护脱脂仔猪,降低乳汁流失压力,减轻断奶应激,改善仔猪的健康和生长,但添加抗菌肽对血清免疫球蛋白含量没有显著影响。
早期断奶仔猪由于消化道缺陷和消化功能发育导致的产奶量减少,加上产奶压力过大,可能对仔猪的生长和健
康产生不利影响。日粮中加入一定数量的抗生素,能够延缓肠道有害微生物的增殖,改善肠道微生态,降低仔猪腹泻,促进其生长发育。结果表明,在仔猪体内,抗菌肽可以取代抗生素,促进其生长[18]。
根据Yoon等的研究显示,日粮中加入0-90mg/kg的抗菌肽能明显抑制断奶仔猪的生长发育;根据刘显军等及覃小荣等的研究发现,日粮中加入3-5g/kg的抗菌肽后,其生长特性明显优于对照组和抗生素组,而1g/kg的试验组则与对照组比较无明显差别[21,22]。所以,在断奶仔猪中,抗菌肽的作用机理及作用仍有待于进一步研究。
4.2不同水平抗菌肽对断奶仔猪消化率的影响
在饲料中加入一定数量的抗菌药物,可以有效地抑制肠道中的有害细菌的生长和繁殖,从而改善肠道的微生态,从而减少仔猪的痢疾,从而促进仔猪的生长发育。根据麻延峰等人将2mg/kg的抗菌肽加入到日粮中,能明显地增加日增重19.41%(P<0.05),对仔猪的腹泻有明显的抑制作用。根据温刘发等对不同生长时期的仔猪进行了试验,发现在不同生长期饲料中添加抗菌肽对腹泻的作用,发现同一剂量的抗痢药对不同生长时期的仔猪具有一定的抗拉作用,而早期使用抗菌肽对减少痢疾的作用明显好于后期[24]。根据苏恺等人的实验发现,在试验前期,饲料中加入0.4%的抗菌肽后,仔猪的日采食量、日增重均较对照下降6.4%;而随着仔猪的消化功能逐渐完善,其促进生长的效果也逐渐降低[25]。
在这项试验中,饲料中抗菌肽水平的增加降低了脱脂仔猪的粪便和肠道细菌如细菌、有害细菌的水平。肠道中的细菌与肠道和葡萄球菌的减少有关。根据我的试验研究,抗菌肽可以破坏脱脂仔猪的肠道有害细菌,可以作为抗生素的替代品。
试验结果显示:添加抗菌肽蛋白后,仔猪的日增重明显增加,仔猪腹泻发生率下降,并能改善其生长发育。抗菌肽是一种广谱的抗菌活性物质,具有抑制肠道微生物繁殖、防治痢疾、提高免疫力等作用。抗菌肽是一种新型的绿色、高效、安全的新型抗菌药物,目前已被广泛应用于临床。将抗菌肽添加到仔猪的饲料中,可以有效地改善仔猪的日增重,减少饲料肉比例,减少腹泻,促进其生长发育,促进其身体健康。
5结论
(1)各试验组与对照组相比,均能提高仔猪的生长性能,并且在日粮中添加150mg/kg抗菌肽试剂仔猪的平均日增重显著提高。
(2)各试验组与对照组相比,均能提高仔猪的消化率,并且在日粮中添加150mg/kg抗菌肽试剂仔猪的消化率显著高于对照组。
综上所述,建议在日粮中添加量为150mg/kg抗菌肽试剂代替抗生素提高仔猪的生长性能及消化率的效果最佳。
致谢
本文的立题、撰写和修改均得到了指导老师的倾心指导、多次反复修正和细致辅导,谨此表示衷心感谢。感谢指导老师在论文写作时提出的修改意见和建议。导师严谨、精益求精的工作作风,深深感染和激励我。在此谨向指导老师致以诚挚的感谢和崇高的谢意。经过几个月来广泛地搜集资料,参考大量文献,归纳整理写出了该篇论文。在论文写作的过程中,深感自己学识肤浅,在分析问题与提出解决问题时不免有疏漏与不当之处,恳请老师的批评指正。在此我还要感谢学院的诸多老师,他们在传道授业的过程中,让我奠定了良好的理论功底。不但给了我学业上的指导,而且也给了我生活上的启发,这会使我终身受益。
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