自拟活血清脂汤抗动脉粥样硬化

　摘要：目的：本实验旨在研究自拟活血清脂汤抗动脉粥样硬化作用，同时对其可能机制进行讨论。方法：利用两类手段，完成动脉粥样硬化大鼠模型的构建工作，这两类手段一个是将维生素D3注射入大鼠腹腔中；一个是用高脂饲料来喂养大鼠。完成建模操作后，随机将这些大鼠分成五组，首先是阳性对照辛伐他汀组；其次是中药常规剂量组和高剂量组；然后是模型组；最后是空白对照组。连续治疗4周，检测血脂水平、炎症细胞因子含量、抗氧化酶活性、内皮功能损伤等相关指标。结果：将模型组与阳性对照辛伐他汀组、中药高剂量组进行比较，在血脂指标水平方面：和模型组进行比较，在HDL-C值上，中药常规剂量组提升并不明显，而另外两组的提升十分明显，在LDL-C、TG以及TC值上，中药常规剂量组下降并不明显，而另外两组的下降十分明显；在炎症细胞因子方面：和模型组进行比较，在IL-10值上，重要常规剂量组提升并不明显，而另外两组的提升十分明显，在IL-8、IL-6以及IL-1β值上，中药常规剂量组下降并不明显，而另外两组的下降十分明显；在抗氧化酶活性方面：和模型组进行比较，在MDA值上，中药常规剂量组下降并不明显，而另外两组的下降十分明显，在CAT以及GSH-Px值上，中药常规剂量组提升并不明显，而另外两组的提升十分明显；内皮损伤指标：同模型组相比，中药常规剂量组ET值无明显程度的下降，NO值无明显程度的升高，中药高剂量组和阳性对照辛伐他汀组ET值有明显降低趋势、NO值有明显升高趋势（P<0.01）。结论：自拟活血清脂汤能有效抗动脉粥样硬化，高剂量效果更好。

　关键词：动脉粥样硬化；自拟活血清脂汤；炎症因子；ET；NO

1引言

随着人们生活方式的改变，越来越多的人开始养宠物，善解人意的小动物给人们带来轻松快乐的时光。但是，人类过度的宠溺，给小动物长久大量地喂食高脂肪的食物饲料，使得越来越多的小动物存在患上心血管疾病特别是因为动脉粥样硬化而引发的冠心病的风险，使小动物的健康受到不同程度的威胁，也成为人类失去陪伴自己小动物的主要原因[1-2]。

而研究者从四类学说着手，对动脉粥样硬化机制情况展开研究，其具体情况为：脂质浸润学说：AS会导致TC、TG、LDL-C值升高，HDL-C值降低；炎症学说：AS会导致IL-1β、IL-6、IL-8值升高，IL-10值降低；氧化应激学说：AS会导致MDA值升高，GSH-Px、CAT值降低；内皮损伤学说：AS导致ET升高，NO降低，损伤内皮细胞功能。

现代医学治疗动脉粥样硬化西药治标不治本，副作用大，远期效果不明显。自拟活血清脂汤（由川芎、当归、丹参、柴胡、熟大黄、泽泻、茯苓、虎杖、枸杞籽油、菝葜、山茱萸、太子参、红花籽油、决明子等14味中药组成），具有活血通脉、调脂化浊等功效。现代药理研究表明，当归、柴胡、菝葜、丹参、熟大黄可以调脂、抗炎、抗氧化、保护细胞内皮，具有抗动脉粥样硬化的作用。本研究通过喂养高脂饲料和腹腔注射维生素D3，建造动脉粥样硬化大鼠模型，观察自拟活血清脂汤剂对动脉粥样硬化的影响。

　2实验用材料与方法

　　2.1实验材料

　　2.1.1实验药物

川芎、当归、丹参、柴胡、熟大黄、泽泻、茯苓、虎杖、枸杞籽油、菝葜、山茱萸、太子参、红花籽油、决明子（张家口市东马道大药房）、维生素D3注射液、辛伐他汀片（张家口市华佗药房）。

　2.1.2实验动物

由河北北方学院提供体重不低于17g，不超过230g的0SD大鼠共五十只。

　2.1.3主要仪器

煎药壶、电子体温计、电子计重秤、玻璃棒、烧杯、注射器、全自动生化分析仪、酶标仪、紫外-可见分光光度计。

　2.1.4实验饲料

普通饲料由河北北方学院提供，而高脂饲料主要由6类物质构成，一是胆酸钠；二是基础饲料；三是白糖；四是蛋黄粉；五是胆固醇；六是猪油，其占比分别为1%、76%、6%、5%、2%、10%。

　2.2方法

　　2.2.1动脉粥样硬化模型的建立及分组

用普通饲料来对大鼠进行喂养，七天后对其进行分组。其中空白对照组的大鼠（十只）还是吃普通饲料，同时将生理盐水注入其腹腔。而其他大鼠则用高脂饲料进行喂食，喂食3天后将维生素D3注入其腹腔。当喂养达到35天后，再展开一次维生素D3注射操作，42天满后，完成动脉粥样硬化大鼠模型的构建工作[3-5]。

此次随机分组，各组大鼠数量都为十只，其余四组分别为模型组、自拟活血清脂汤常规剂量组、高剂量组、阳性对照辛伐他汀组。

　2.2.2中药煎剂和辛伐他汀悬浊液制备

中药煎剂：取川芎15g、当归15g、丹参15g、柴胡10g、熟大黄5g、泽泻5g、茯苓10g、虎杖15g、枸杞籽油20g、菝葜20g、山茱萸15g、太子参10g、红花籽油10g、决明子10g，加水煎煮2次，合并药液，浓缩至每毫升药液含1g生药的浓度，保存备用。

辛伐他汀悬浊液：片剂加蒸馏水制成混悬液，浓缩至每毫升药液含0.2mg生药的浓度。

自拟活血清脂汤常规剂量组：灌胃方式给药，每日下午灌胃一次，2ml/kg。

自拟活血清脂汤高剂量组：灌胃方式给药，每日下午灌胃一次，4ml/kg。

阳性对照辛伐他汀组：灌胃方式给药，每日下午灌胃一次，1mg/kg。

模型组、空白对照组：只需要每天下午用3mg/kg的生理盐水进行一次灌胃操作，并不用用药。

　2.2.3指标测定方法

炎症细胞因子含量、抗氧化酶活性、血脂指标水平、内皮损伤指标的测定：SD大鼠处死前禁食18小时，次日将全部动物腹腔注射0.5ml/kg地西潘麻醉，然后从大鼠腹主动脉进行取血操作，取血量为五毫升，接着利用光度计对其血清中三类物质含量进行测定，这三类物质即、、；通过分析仪对其血清中四类物质含量进行测定，这四类物质即、、、；然后利用酶标仪对其血浆中四类物质含量进行测定，这四类物质即、、、；利用Griess比色法对其内皮损伤NO、ET值进行测定。

2.2.4数据处理

通过SPSS22.0软件来展开统计学分析，有差异和有显著差异分别用P<0.05、P<0.01来表示。

　3结果与分析

　　3.1造模情况

造模后SD大鼠出现消化不良、便秘、精神沉郁、反应迟钝等症状。血清中、、值上升，而值显著下降。

3.2指标测定

　　3.2.1血脂指标水平的测定

由表3.1可知，模型组SD大鼠血清中TC、TG、LDL-C值同空白对照组相比，有明显升高趋势（P<0.01），HDL-C值有明显降低趋势（P<0.01）；同模型组相比，中药常规剂量组TC、TG和LDL-C值无明显程度的下降，HDL-C值无明显程度的升高，中药高剂量组和阳性对照辛伐他汀组TC、TG和LDL-C值有明显降低趋势、HDL-C值有明显升高趋势（P<0.05）。

表3.1各组SD大鼠血脂指标水平（s,mmol/L,n=10）

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注：同模型组相比，“*”差异显著，P<0.05；同空白对照组相比，“#”差异极显著，P<0.01。

　3.2.2炎症细胞因子的含量

由表3.2可知，模型组SD大鼠炎症细胞因子IL-1β、IL-6、IL-8值同空白对照组相比，有明显升高趋势（P<0.01），IL-10值有明显降低趋势（P<0.01）；和模型组进行比较，在IL-10值上，重要常规剂量组提升并不明显，而阳性对照辛伐他汀组和中药高剂量组的提升十分明显，在IL-8、IL-6以及IL-1β值上，中药常规剂量组下降并不明显，而阳性对照辛伐他汀组和中药高剂量组的下降十分明显。

表3.2各组SD大鼠炎症细胞因子的含量（s,pg/L,n=10）

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注：同空白对照组相比，“#”差异极显著，P<0.01；同模型组相比，“*”差异显著，P<0.05。

　　3.2.3抗氧化酶活性的测定

由表3.3可知，模型组SD大鼠抗氧化酶活性GSH-Px、CAT值同空白对照组相比，有明显降低趋势（P<0.01），MDA值则提升明显；和模型组进行比较，在MDA值上，中药常规剂量组下降并不明显，而阳性对照辛伐他汀组和中药高剂量组的下降十分明显，在CAT以及GSH-Px值上，中药常规剂量组提升并不明显，而阳性对照辛伐他汀组和中药高剂量组的提升十分明显。

表3.3各组SD大鼠抗氧化酶活性的测定（s,U/ml,n=10）

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注：同空白对照组相比，“#”差异极显著，P<0.01；同模型组相比，“*”差异显著，P<0.05。

　3.2.4内皮损伤指标的测定

由表3.4可知，模型组SD大鼠内皮损伤指标ET同空白对照组相比，显著性升高，NO显著降低（P<0.01）；同模型组相比，中药常规剂量组不论是ET还是NO值都没有得到明显改善，但是阳性对照辛伐他汀组以及中药高剂量组的这两类值则分别处于明显下降和明显提升态势中。

表3.4各组SD大鼠内皮损伤指标的测定（s,n=10）

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注：同空白对照组相比，“#”差异极显著，P<0.01；同模型组相比，“*”差异显著，P<0.05。

　4讨论

　　4.1动脉粥样硬化研究机制

作为一种系统性疾病，动脉粥样硬化涉及脂质浸润学说、炎症学说、氧化应激学说和内皮损伤学说等机制，是一种多靶点、多通道的疾病[6]。所以本实验也用这四个机制学说来评价自拟活血清脂汤对抗动脉粥样硬化的效果；而辛伐他汀片为目前临床常用的调节血脂、抗动脉粥样硬化药，以其作为阳性药物对照，理论上具有科学性。

脂质浸润学说：从根本上来看，AS是脂质受到血浆的侵入后动脉壁出现的反应。TC、TG、LDL-C、HDL-C作为目前医学界公认的评价血脂水平最重要的四项指标[7]，所以用这四个指标来研究脂质浸润学说。

炎症学说：它的提出者是学者Ross[8]。当该学者不断研究后发现，对于AS而言，它的关键因素就是炎症[9]。当出现易损斑块时，就会存在两类病理学特征，一个是会分泌许多炎症因子；一个是会出现许多炎性细胞浸润的情况[10]。、、和IL-10是炎症学说中具有代表性的指标，因此具有一定的研究意义。

内皮损伤学说：各种刺激因素造成内皮细胞不同程度的损伤，使其通透性增加、变性坏死脱落，最终形成AS。

氧化应激学说：此学说讲的是当机体遭受有害刺激时，其抗氧化和活性氧就会失衡，此时就会积聚过多氧自由基与有关代谢物，从而产生氧化损失[11]。

　　4.2动脉粥样硬化大鼠模型

能够发现，因为生物酶活性等因素的影响，导致面对胆固醇，SD大鼠存在耐受性，而且高脂饲料要想形成AS病变也较为困难。此次实验结合学者梁桂洪等的研究，模型组大鼠喂养高脂饲料和腹腔注射维生素D3，而空白对照组则吃普通饲料，同时将生理盐水注入其腹腔，如此便完成了动脉粥样硬化模型的构建工作[12]。当将维生素D3注入腹腔时，会令血管壁钙出现超标现象，从而令动脉管壁内皮完整性受损[13]，这对于AS的形成十分有利。

通过实验结果发现，和空白对照组进行比较，在值上，模型组的下降十分明显，在、以及值上，模型组的提升十分明显，这表示模型构建是成功的。

　4.3自拟活血清脂汤对大鼠动脉粥样硬化的影响

自拟活血清脂汤由川芎、当归、丹参、柴胡、熟大黄、泽泻、茯苓、虎杖、枸杞籽油、菝葜、山茱萸、太子参、红花籽油、决明子药物组成，其中川芎、当归、丹参、大黄活血化瘀，山茱萸、太子参、枸杞籽油补气益脾，虎杖、菝葜活血解毒，化脉通络，泽泻、茯苓利水渗湿，全方共奏活血化瘀，益气通络之功[16]。现代药理研究发现，柴胡、茯苓可降低血清胆固醇、甘油三酯的水平，熟大黄、泽泻具有降低血脂作用，丹参、红花籽油、决明子具有通脉、调脂作用，茯苓、菝葜具有抗动脉硬化作用[17]，全方可从抗炎、抗氧化、保护内皮功能等多途径治疗动脉粥样硬化。

　5结束语

自拟活血清脂汤通过多途径抗动脉粥样硬化，且以高剂量效果最好。

　参考文献

[1]郑建仙.二十一世纪的主导食品──功能性食品[J].广州食品工业科技,1995(02):15-17+21.

[2]于守洋.关于中国营养保健食品的若干讨论意见之二：中国营养保健食品的理论基础与有效成分原料资源[J].中国公共卫生,1996(02):70-72.

[3]杨军珂,郭延松,吴宗贵,黑淑敏,宋云凌,胡桃红.一种大鼠动脉粥样硬化斑块模型的建立[J].中国心血管杂志,2004(05):353-356.

[4]刘大男,何作云.运动锻炼对血脂异常患者血清黏附分子、细胞因子水平的影响[J].中华物理医学与康复杂志,2004(11):40-43.

[5]燕珊.化痰法干预动脉粥样硬化机制的初步研究[D].广州中医药大学,2014.

[6]杨小蓉,聂文静,邢军,江岩.大鼠动脉粥样硬化模型的建立与评价[J].现代预防医学,2016,43(09):1653-1656+1674.

[7]周红,吴晓燕,袁艺标,戚晓红.三种剂量维生素D_3结合高脂饲料建立大鼠动脉粥样硬化模型的比较[J].中国动脉硬化杂志,2012,20(11):995-998.

[8]孙赫,梁桂洪,林勇凯,黄宇新.高脂血症大鼠模型几种造模方法的筛选及优化[J].动物医学进展,2014,35(10):89-93.

[9]薛仪强,黄石安.一种快速建立大鼠动脉粥样硬化模型的方法[J].中国医学创新,2014,11(29):1-4.

[10]王连辉.参麦注射液联合舒血宁注射液治疗冠心病心绞痛疗效观察[J].中外女性健康研究,2020(03):38+62.

[11]Xinsheng Zhang,Changyong Xue,Qing Xu,Yong Zhang,Huizi Li,Feng Li,Yinghua Liu,Changjiang Guo.Caprylic acid suppresses inflammation via TLR4/NF-κB signaling and improves atherosclerosis in ApoE-deficient mice[A].中国营养学会临床营养分会.第16届全国临床营养学术会议资料汇编[C].中国营养学会临床营养分会:,2018:1.

[12]刘小平.普罗布考联合阿托伐他汀对冠心病患者ox-LDL和ox-LDL抗体的影响[D].中国医科大学,2010.

[13]李震霄,邹洪梅,孟晓萍.氧化应激促进动脉粥样硬化机制研究进展[J].中国动脉硬化杂志,2009,17(08):702-705.

[14]杨艳,乔克,胡来明,朱波.缬沙坦联合镇肝熄风汤对老年非杓型高血压患者血小板活化及纤溶活性的影响[J].现代中西医结合杂志,2020,29(14):1546-1549.

[15]王艳.2型糖尿病足溃疡患者前列环素、前列环素合成酶的变化及其临床意义[D].广州医学院,2009.

[16]钟赣生.中药学[M].中国中医院出版社,2016.

[17]毛城,刘福明.中医药防治动脉粥样硬化作用机制研究进展[J].中医药临床杂志,2020,32(03):592-596.

　　致谢

回首我的大学生涯，大专的奋进拼搏，本科的沉着冷静，都离不开每位老师的悉心指导，他们不厌其烦，不求回报的教导是我一生的财富。

本篇论文在老师的认真指导中完成，在我抓耳挠腮没有思绪的时候，老师循序渐进的引导给了我前进的方向；在我心情低落准备放弃的时候，是老师耐心的安慰给了我鼓励；在我因为实验结果纳闷不解的时候，是老师不厌其烦的讲解让我继续前进。由衷的感谢吉梅老师，深深的教诲终生不忘。

感谢图书馆为我们撰写论文、搜集资料提供了便利条件。

感谢实验室的各位老师和同学们在实验操作过程中给予我的帮助和支持。

感谢朋友和同学亦师亦友的陪伴。

感谢父母默默的支持和无条件的信任。