一例犬细小病毒的诊断与防制

摘要：犬细小病毒病是一种发病急的热性传染疾病，其传递的首要方式是接触病犬的分泌物来感染犬细小病毒。临床表现关键以白细胞计数呈现显著降低、剧烈呕吐、排番茄汁样粪便、渐进性消瘦为主。此外，它也有三个显著特点，分别是较高的病发率、较高的致死率和极强的感染性。如何研究犬感染犬细小病毒病的治疗早已变为了一道难题，文中为此构思针对该问题开展进行调查。笔者根据对潍坊某宠物医院门诊2021年8月期内问诊的1例病犬开展参与并治疗，并对其开展分析。现谈一谈关于犬感染犬细小病毒感染的确诊与治疗体会。

　关键词：细小病毒；治疗；预防

　1引言

为了更好地确诊犬身患犬细小病毒病，根据对患犬开展临床表现、血常规检查、血液生化、血气、影像诊断、排泄物和病原学等查验，诊断该犬感染犬细小病毒。根据对患犬开展治疗，患犬痊愈。

犬细小病毒在种类上属细小病毒科，细小病毒属。病毒基因组为多肽链条状DNA。犬细小病毒感染是近些年宠物犬上比较常见的烈性传染病，临床症状以急性出血性肠炎和非化脓性心肌炎为特点。近年来，犬感染犬细小病毒病经常出现，但报道较少。因为犬泛白细胞减少症(又被称为细小)在犬上感染的临床表现与犬细小病毒感染类似，又因临床误区(犬细小病毒不会感染犬或犬细小病毒即是犬细小病毒)。在出现急性病毒性感染出血性肠炎的犬的确诊上多半会忽视清除犬细小病毒感染的概率，因而造成治疗率较差的状况。笔者对接诊一例犬感染犬细小病毒病的病案开展治疗分析，为本病的治疗提供诊治经验。

　2犬细小病毒病研究进展

　　2.1犬细小病毒

犬细小病毒病的病源为犬细小病毒(CPV)，归属于细小病毒科、细小病毒属的组员。电子显微镜下CPV病毒粒子外形呈圆形或六边形，无囊膜构造，直径大约为20~24nmT。该病毒基因组为单根负链DNA病毒，基因约由5200个多肽链构成。

CPV对外部的物理化刺激具备较强的抵抗能力，在室内温度情况下储存90天，传染性仅轻微下降，在排泄物中可生存几个月至多年。超低温情况下储存，其传染性没有显著转变。该病原体对医用乙醚、酒精﹑氯仿等常用消毒剂不比较敏感，但紫外线、氧化物、福尔马林溶液等对其功效显著。因而养犬户需选择准确的消毒方法消灭CPV，以避免CPV传播蔓延。

2.2犬细小病毒病流行病学

初次分离出犬细微病毒是在1967年，而且有研究者将他取名为犬细小病毒I型。1977年学者在科学研究一只丧生于结肠炎病犬的排泄物时，不经意间发现细小病毒的存在，随后的一年中，有学者持续研究此类病毒感染，总算在一只身患结肠炎造成身亡的病犬身体内分离出了该病毒，确认了它有别于犬微小病毒感染，与此同时将其取名为犬细小病毒Ⅱ型[1]。以后有大量不同学者追随研究，均在身患结肠炎身亡的犬只身体内发现此类病毒感染，并相继报道出他对犬只生命的影响[2]。在1982年，我国梁士哲学者意识到广泛因结肠炎身亡的病犬很有可能与此病毒感染相关，接着明确提出解剖学研究因出血性肠炎而死亡的病犬，发现了犬细小病毒在死亡犬体内的残余，并在1983年由徐汉坤等发布，诊断患出血性肠炎的病犬广泛死因，正式提出此病毒感染在我国犬只间的流行[3]。之后相继有学者研究发现犬细小病毒I型无高致病，而犬细小病毒Ⅱ型有致病性，而且会造成犬肠道和心肌的病症，在医学上患病率和致死率都非常高。犬细小病毒在被发现的短短两年时间早已有抗原体飘移状况的发生，不拘于只感染犬，并且直到如今早已出现了多个亚型。

　2.3犬细小病毒病发病机理

犬细小病毒发病原理关键是经口传播病毒进入机体，在口咽喉部开展拷贝繁殖，与宿主细胞中转铁蛋白蛋白受体结合迅速入侵并感染宿主细胞，以后随血浆流动方向浸染寄主其他器官，这些机体器官带有迅速瓦解的体细胞，形成大的嗜酸性粒细胞和内涵体，在消化道会造成最明显的毁坏[4]。因此病犬大多数情况下很显然的结肠炎病症，如恶心呕吐，严重腹泻等。可是犬细小病毒全身浸染，最明显的是神经细胞，心脏会由于细小病毒的损害而出现心肌肿胀，毛细管血肿。盲肠洁肠表层也有出血点，肝脏有梗死灶。犬细小病毒伴随着血液走向直接浸染肠黏膜，因此及时应用抗原治疗可以有效地控制病毒感染的进一步进攻。因为犬细小病毒与宿主细胞结合有一定标准，因此临床表现随之转变[5]。因而犬细小病毒只在有转铁蛋白蛋白激酶的体细胞上拷贝繁殖，例如肠黏膜，淋巴组织等处，淋巴结萎缩造成了淋巴细胞减少。

　2.4犬细小病毒病临床症状

　　2.4.1肠炎型

早期症状表现为突发恶心呕吐，随后排出粘附黏液的淡黄色排泄物。病症显著期时，病犬体温显著上升，胃口毫无，无精打采，排出大量番茄汁样稀便伴随明显腐臭味，随病情发展，患犬可视性黏膜灰白色，呼吸困难，脱水严重直至身亡[6]。

解剖病犬时表皮可观测到皮肤干燥，呈脱水状，目光凹陷，球结膜灰白色，全身上下淋巴肿大。割开腹部，有带血腹水排出，肠胃表层有溃烂和坏死灶，肠腔深红色且增大增粗，肝部呈暗紫色肿胀，心脏管呈右心扩张情况。割开肠胃肠由此可见血液和黏液混合物，肠腔显著变厚，黏膜有散在坏死点，肠腺消退，残留腺管中有萎缩的残片，肠系膜横切面呈大理石样。直肠内有浓厚腥臭的血液水样便。胆囊彭大且含大量绿色胆液，胆囊壁黏膜光洁，也呈绿色。肝部质脆易破碎，横切面呈颗粒凝结不良的血液。脾脏肿大且表层有黑色色斑。

2.心肌炎型2月龄幼犬多好发。病犬最初胃口、精神面貌正常，有时逆呕却看不到内容物，或轻微腹泻，随现病情转变，病犬体温上升，心跳加速，半小时左右后，观察到可视性黏膜淡白，呼吸困难，抽动状，很有可能随之恶心呕吐，因心力衰竭而死。

该类临床表现取决于心脏和肺部。解剖病犬由此可见心血管扩大，心脏呈乳白色花纹状，心血管内有积血块，心房壁变软。损伤的神经细胞中有核内包涵体。肺脏表层呈斑片，有浮肿状况，肺横切面经压挤会排出液体。

　2.5犬细小病毒病的病理变化

犬细小病毒病的临床表现：结肠炎型胃内无食糜，动物体快速消瘦脱干，胃膜上面有浅黄色或黄鲜红色的胶样黏液。空肠和回肠的特征变病更为比较严重。肠子内腔发胀、有一些出血点，大肠内的排泄物稀软、呈酱油色、伴随腥味气味。肠系膜淋巴肿大呈深红色。

心血管容积增大，部分有点儿状流血。肺绝大多数轻微浮肿呈暗红色，支气管及气管内有大量泡沫塑料样液态构。肾脏功能、肝脏部分有出血点乃至出血性梗死。肝脏肿大，呈暗紫色，材质脆，创口外翘，切面血凝固不良。电子显微镜下观察发现，小肠绒毛减短，乃至消退看不到。肠黏膜原有层血管红肿，体红细胞减少。

心脏病型：关键临床表现在心血管和肺。心外膜散播有淡黄色或灰白色花纹，心肌肉组织转性呈乳白色花纹状，一般有流血花纹。肺部呈严重的小气泡型发胀，呈深灰色或花朵状，切面有大批量的血液液态排出。肺部肿胀情况严重会牵制心血管，以后肺脏萎缩导致身亡。心脏血管扩张、血肿。在转性的心脏周边有少许的中性粒、淋巴结和浆细胞侵及。

　2.6犬细小病毒病的诊断

现阶段，动物诊治技术主要是临床医学观察，依据诊治经验做出基本确诊，可是有很多病症需要实验室检查才可以进一步的诊断。实验室确诊方式经常有下列几类：

(1)CPV的分离：取病犬排泄物或将死犬的肠内容物，离心式过滤除菌或加乙醚4°C留宿解决，可以在犬肾、犬肾等传代细胞上注射，开展病毒感染的分离。对转移的病毒感染还要用免疫荧光、凝血四项和血凝抑制试验等来认证。此方法的具体不足是敏感度低，只有在感染中后期才可以检验到病毒感染。非特异强、试验结果真实度高，但消耗时间，不可以迅速确诊。

(2)直接电子显微镜与免疫电子显微镜观察：此方法精确、迅速、简单。将CPV患犬的排泄物或肠内容物采用磨碎、离心的方式取上清液，随后负染数分钟，在镜下观察就能得到结果，可是细胞培养基物的观察效果更强。

(3)血凝四项和血凝抑制试验：在血凝四项试验中，用0.5%?1%的猪红细胞作为标示系统，对带有CPV的排泄物或细胞培养基物进行检验，HA>1:80则为呈阳性，随后做血凝四项抑制试验进行确认。HI也可用以该病抗体检测，采用96孔板可快速检测大量样品，可用以临床流行病学的调研和抗体检测。

(4)酶联免疫吸附试验(ELASA)：通常用来检验犬细小病毒的ELASA方法包含竞争ELASA、间接ELASA等。我国国防医科院采用双夹心酶标免疫法，将替尼和多抗紧密结合，研发出犬细小病毒迅速诊断试剂盒。2006年，中国报道了用纯化的犬细小病毒为抗原体，创建检验犬细小病毒抗原的间接ELASA方法。(5)免疫层析法：此方法使用方便、迅速，有利于试验者实际操作。殊不知，只有当样品中富含很多的病原体时才可以迅速发生显著的阳性反应条带，当病毒感染成分低时，诊断率低。

(6)聚合酶链反应：PCR以及有关技术，具备极度的特异性和敏感性，常被用以CPV病毒性感染的迅速确诊和基因型的调查。大部分的PCR方法均以VP2遗传基因作为增加的靶遗传基因。PCR法可检验到犬的排泄物中少量的病毒感染DNA，具备很高的非特异、敏感度和重复。梯度方向PCR法的非特异比基础PCR法逐步提高，原点PCR法可辨别病毒感染的潜伏感染和活动感染，具备可以组织定位和敏感度高的优势，可是实际操作比较复杂，非常容易出现阳性，稳定性不够好。

　2.7犬细小病毒病的治疗

犬细小病毒病的心肌炎型病例大多数预后不良，出现心电图的转变时都免不了身亡。

犬细小病毒性肠炎的针对性治疗法：临床表现主要是腹泻、恶心呕吐、大便出血，对症治疗法应掌握住这3个关键。腹泻时内服糅酸蛋白、次硝酸锡等，呕吐时注入胃腹安等，大便出血时注入维生素K1、止血敏等止血剂。调整酸碱、保持心脏功能，最经常使用的治疗方法是强心补液，输液时可采用乳酸钠林格注射剂、0.9%氯化钠注射液、5%葡萄糖注射液。

支持疗法：此病是病毒病，应用犬细小病毒单抗、高免血清蛋白(健康犬或康复犬的血清蛋白)、干扰素、犬佳生命源、人免疫球蛋白等生物制药效果更好。在护理上应留意治疗前期应空腹1-2d；手术恢复期要少量多餐的喂稀软易消化的食物，开始恢复到正常的膳食的情况。

　2.8犬细小病毒病的危害

肠炎型：潜伏期10天左右，发病初期病犬精神食欲均下降，可能会伴有呕吐。若未及时诊治，呕吐物可能会随发病时长而有带血，12小时以内会伴随血便。随病程加长，严重脱水，逆呕却无排出物，心率加快，体温降低至常温以下，最终死亡。

心肌炎型：发病急，病程短，无明显临床症状，且同窝百分之七十突然死亡，死亡前出现心率加快，呼吸困难，轻微腹泻等症状。大多数幼犬还有粘膜苍白，肢端发凉等症状。

　2.9犬细小病毒病的预防

犬细小病毒病的避免办法是及时疫苗接种，加强喂养管理，对环境开展完全消毒杀菌，及减少应激反应的发生。疫苗接种是现在最常见且最有效的防范方式。现阶段，预防犬细小病毒病的疫苗普遍的有同源灭活苗、同源弱毒苗﹑异源灭活苗、异源弱毒苗。宠物诊所常见的疫苗包含国内CPV消灭苗、五联弱毒苗、六联弱毒苗，X辉瑞卫佳5和卫佳8，荷兰英特威六联苗等。在犬细小病毒病的防范中，免疫时间和免疫力程序也一样关键。通常在幼犬10~12日龄时开展首免，此阶段为细小病毒病多发期，可6日龄开展首免，接着21天之后在开展1次加强免疫，间距21天再度加强免疫。通常可产生1年的免疫维护效果。也可去宠物诊所检验抗原水平。自此每年开展1次加强免疫就可以。在未做完免疫力系统时，尽量减少接触其他犬和有可能感染的环境。

　　3一般资料与方法

　　3.1一般资料

家犬阿狸，雄性，5月龄。体重为2.57kg，未去势。(1)据主诉，该犬从就诊当日凌晨开始频繁呕吐，初期呕吐为胃内容物，后期呕吐物为黄色带有泡沫状液体。精神一般，当日食欲差。且该犬有乱咬东西的习惯，排便软，有腥臭味。未进行免疫，已做驱虫。家中5d前有犬因感染细小病毒而死亡。(2)经临床检查体温为39.8℃，触诊腹部痛感强烈，患犬躲闪不愿被触摸，未触诊到异物，肠鸣音稍大。肛门处毛发打结、色黄、有异味及干涸粪便。

　3.2实验室诊断

　　3.2.1血常规检验

由于病犬月龄小，虚脱严重，采取颈静脉采血。由一人保定患犬四肢，采血医生固定病犬头部，首先将颈部被毛剃去，再将采血处皮肤用酒精消毒，左手将犬颈部向后背部拉直，大拇指压住静脉使其怒张，右手持注射器沿血管方向刺入抽取病犬血液1mL左右于EDTA管中，取血后使用棉球按压止血。使用血常规检测仪，主要检查红细胞，白细胞，淋巴细胞，嗜中性粒细胞等。

　3.2.2胶体金试纸条诊断

胶体金试纸条检测方便快捷，准确率85%以上，线下临床工作应用广泛。在免疫学中，抗原抗体可以特异性结合，胶体金有显色反应，所以作为反应媒介，最后通过层析过程使抗原抗体结合发生反应，最终实现目标。

在弱碱环境下，带正电荷的蛋白质分子可以与带有负电荷的胶体金通过正负电荷相互吸引结合。对照组和反应组上分别固定了两种抗体，用来特异性识别不同的抗原，反应组是为了识别需要检测的抗原，而对照组则是识别与胶体金相互吸引结合后的抗体。试纸板里面含有可以变成红色的胶体金颗粒，随着检测样本的浸润，利用特异性结合反应可以判断结果。

检测该病犬时选用犬细小病毒(CPV)/犬冠状病毒(CCV)联检试纸条和犬瘟热(CDV)试纸条。检测方法：①使用稀释液沾湿后的棉签，采集病犬眼鼻口分泌物，将采集后的棉签混入稀释液管中并且充分搅匀，滴入犬瘟热试纸条的S孔中3滴，十分钟左右查看结果。

②使用稀释液沾湿后的棉签，采集病犬新鲜粪便，将采集后的棉签放入稀释液管中充分搅匀，滴入犬细小病毒

(CPV)/犬冠状病毒(CCV)联检试纸条的S孔中3滴，十分钟后判断结果。

结果判定：

(1)阳性(+)：对照组处出线红色线条，检测组也显示红色线条时；

(2)阴性(-)：对照组处出线红色线条，检测组无显色情况；

(3)无效：当对照组处不显示红色线条，检测组有无显色都无效。

　4结果与分析

　　4.1临床症状诊断结果

经临床诊断后得知该病犬于犬舍并无其他病史但未接种疫苗，呕吐物为胃内容物，长期腹泻导致粪便稀薄且有刺鼻腥味，体温高达40.3℃，眼球及口腔可视粘膜苍白，对腹部触诊敏感，腹部肌肉收缩，听诊有明显杂音。

该病犬发病后表现为食欲不振，精神萎靡，体温升高的同时也伴随腹泻，随病情发展，腹泻物带血且有刺鼻腥味，接着又出现呕吐现象。呕吐物由刚开始的食物残渣转变为粘液状物。由于病情加重，病犬不愿进食，发生脱水现象，表现为被毛杂乱没有光泽眼皮、眼皮和体表皮肤松弛无弹力、鼻头干燥、可视黏膜有点苍白[13]。

根据病犬临床症状诊断结果并结合既往病史，初步推测：该犬大概率感染了犬细小病毒或犬瘟热病毒，不排除混合感染可能性。

4.2血常规结果

项目结果单位参考范围白细胞数目4.9↓10/L5.5-19.5

红细胞数目3.6↓10/L4.6-10.0

中性粒细胞数目1.9↓10/L2.1-15.0

淋巴细胞数目7.3↑10/L0.8-7.0

红细胞压积59↑%28.0-49.0

注:↑表示上升/增加，↓表示下降/减少

由表4-1可以看出白细胞总数和红细胞总数有所下降，中性粒细胞相对减少，淋巴细胞和红细胞压积相对增加，由此可知该犬患病因为病毒感染。

　4.3胶体金试纸条诊断结果

图4-1胶体金试纸条结果

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如图4-1所示，结果判读：==犬细小病毒(CPV)阳性，犬冠状病毒(CCV)/犬瘟热(CDV)均为阴性，因此最终确诊该犬携带犬细小病毒。

　5治疗

　　5.1特异性治疗

参考文章得知病毒侵入机体后，首先在口咽部复制，随后通过血液达到肠粘膜[14]。首先采用注射犬单克隆抗体进行抗病毒特异性治疗，增强病犬的免疫力，抑制病毒对机体细胞的侵略。抗体按照来源可分为天然和免疫抗体；根据生物学功能分为IgG、IgM、IgA、IgD、IgE五种；按照不同作用对象分为抗毒素、抗细菌、抗病毒和亲细胞抗体；根据抗原与抗体结合反应分为完全和不完全抗体。除了坚持注射单克隆抗体3-5天外还应同时使用免疫球蛋白增强免疫效果。该病犬选用静脉滴注使用氯化钠稀释后的犬血免疫球蛋白，使用与剂量单克隆抗体一致。

　5.2对症疗法

病犬就诊时测量肛温已经到达40℃以上，首先选用皮下直射清开灵进行降温治疗，皮下注射清开灵1.5mL。

病犬因为呕吐、腹泻而严重脱水，因此首先应给患犬静脉补液。治疗应先补盐为主，随后补充糖，乳酸林格液20mL和5%葡萄糖溶液10mL，适当情况下添加能量合剂(ATP+辅酶A)，在此期间即使情况好转也要严格禁食、水。同时因为腹泻过于严重，也要同时配合使用中药白头翁，此中药可以清热解毒，凉血止泻，有效的缓解病犬腹泻情况，后期腹泻症状不再出现后可以换用益生菌调理肠胃。因为病犬呕吐物已经为黏性胃液，前三天需要皮下注射止吐药物，如格拉司琼等，无呕吐状况时停用。病犬就诊时伴有严重血便，应进行止血治疗并同步消炎，每天静脉滴注酚磺乙胺注射液1.5mL和注射用头孢噻肟钠3mL，酚磺乙胺与头孢类不建议同时输液，所以首先入壶酚磺乙胺，根据输液速度十分钟左右后向盐水中加入头孢噻肟钠。

　5.3加强护理

早期严格把控饮食，禁食禁水，防止刺激肠胃。待病情有所好转，如一天之内没有呕吐和腹泻症状后，可以少量喂食流质食物。天气寒冷尤其是夜间温度更低，要做好病犬的保暖措施，防止受寒受冻。

　5.4治疗结果

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经过一周治疗，病犬情况好转十分明显，从他治疗的第四天状态开始好转，无呕吐腹泻，喂食了流质粮食，到了第七天情况更加稳定以后，精神状态不再萎靡不振，四处活动，食欲增加，基本恢复健康状态。

　6讨论

　　6.1诊断方法

在这个病例中，根据病犬临床症状初步诊断，锁定疾病的范围。再利用胶体金试纸条快速检测判断是否准确，再结合血常规化验结果最终确定该病犬感染肠炎型犬细小病毒。除了这三种方法结合诊断，也可以利用血凝(HA)与血凝抑制试验(HI)，病毒分离鉴定等，但利用血凝抑制试验并不能准确判断犬细小病毒病犬的自身免疫情况，因此本实验中并未使用。

6.2感染途径

(1)健康犬食用被犬细小病毒污染过的饲料而经消化道感染发病；

(2)人、虱、苍蝇等成为病毒的间接携带者，感染健康犬。

该病犬患病主要原因在于从未接种疫苗，并且在犬舍这种人来人往的地方生活间接接触感染源。为了降低本病的发病率，主人应将科学的饲养和按时注射疫苗的方式相结合，有效地预防犬类细小病毒病，尽量接种宠物医院使用的七联苗或五联苗，2月龄时就可注射首针联苗，然后隔一个月继续加强免疫。而狂犬疫苗属于灭活疫苗，可以与最后一针联苗同时免疫，因为这时母源抗体水平已经很低，需要后天加强免疫效果。

　6.3治疗

病例确诊以后需要尽快采取特异性治疗，该病犬注射单克隆抗体和静注犬免疫球蛋白不仅加强免疫力，还加速病毒排出。并且同时进行对症治疗和中西医结合疗法。对症治疗主要是缓解病犬的呕吐，腹泻等症状。由于病犬经常呕吐，是其体内失去大量钾离子，长期腹泻会造成碳酸氢根离子的流失，而且治疗期间禁食禁水，病犬体内能量流失，脱水严重，机体平衡被打破，因此在进行特异性免疫治疗和对症治疗的同时，也应该同时采用中医结合的方法给病犬补充丢失的电解质和维持新陈代谢所必需的的能量和营养物质，维持生命体征。另外治疗期间也应该给病犬温暖，舒适的环境，更有利治疗。

　6.4预防

　　6.4.1按时接种疫苗

定期接种疫苗是预防犬细小病毒的关键，尽量选择优质疫苗，且首次免疫期间不随意更换疫苗。较小的幼犬尽量圈养至首次免疫全部接种完毕后，接种疫苗期间尽量不外出，以防在此期间被病毒感染。若家里有多只犬，幼犬尽量与每天外出的成犬隔离开饲养，同时成犬也尽量每年按时接种疫苗至11岁。

　6.4.2饲养条件

给犬准备的空间要空气流通，定期而且给犬窝、食物盆、玩具等消毒。粮食选择也要选用含有蛋白质、微量元素等，增强免疫力。狗狗尽量选择在温暖的天气洗澡，冬天或者初春尽量避免洗澡，若是着凉会导致免疫力低下，病毒会有机可乘。

结论

该病犬在临床症状明显期就被主人带到了医院就治，根据症状判断可能为犬细小病毒病或犬瘟热，经过一系列特异性诊断方法，最终确诊该病犬感染了犬细小病毒。确诊后立即采取治疗，使用特异性疗法，对症治疗，中西医结合疗法对该病犬展开药物治疗，治疗过程中同时做好防寒保暖，并将其与其他犬只隔离消毒。结合疗法坚持治疗一周后病犬呕吐，腹泻等症状逐渐消失，精神和食欲基本恢复正常。在饲养宠物中，通过免疫接种可以有效预防此类传染病的发生，为宠物健康带来保障。

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　致谢

在论文完成之际，我首先我要感谢的就是我的论文指导老师，在论文筹备的阶段导师就对我们做出要求，从论文的开题到论文初稿的修改直至论文定稿阶段，我的导师都会不厌其烦的给我的论文提出专业性的意见，为我研究论文的方向做出指导，在论文撰写的过程中也会及时得对我遇到的专业方面的难题给予一定的指点和帮助，提出了许多对我有益的改善性意见。也真心的感谢每一位教师的谆谆教诲，给予了我们各种专业的知识和不断努力的力量。