摘 要
在中医方面,丹参益于心脏及肝脏,能够清心、凉血,保护机体心血管,增强机体抵抗力,改善脏器的微循环,促进细胞再生功能;川穹能够活血化瘀,防辐射、抗病菌、镇静、镇痛。综上所述,两者结合在一起可治疗及预防多种疾病。丹参与川穹是两味药材,两种药材结合在一起有活血化瘀,保护机体的心血管,降血脂,镇静镇痛等作用。本文主要总结了丹参与川穹药的药理作用,归纳了相关人员在丹参川穹药对于代谢的影响方面的研究资料,做以下综述。
关 键 词:川穹;丹参;药理;代谢
1 绪论
1.1选题意义/背景及目的
丹参(英文名称SalviamiltiorrhizaBunge),在我们国家,是传统中草药中使用最为广泛的一种药材。其能够推动血液循环。让气虚得到缓解,能够用于制剂的生产中,可以对心脑血管的疾病起到治疗的作用。丹参酮不仅具备安神养心,止痛祛瘀,平静神经和活血化瘀的功效,最近几年,深入研究还发现其新的药理作用,包括抗肿瘤,对心脑血管的疾病进行治疗,抗炎,抗菌及抗氧化等功能,所以,丹参应用前景尤其广阔。现阶段,已经有大量科学报道是关于提取丹参内脂溶性的成分,也就是分离丹参酮类制备的方法,不过使用不同的方法进行制备分离,让其丹参酮的物质在纯度和质量方面层次不齐。
川芎嗪(英文名称tetramethylpyrazine,英文简写TMP,也叫作天然的四甲基吡嗪),属于川芎药材内主要的成分,其功能较多,包括祛瘀活血,器官缺血,抗心肌,降血压以及扩张血管等。最近几年,许多报道指出川芎嗪能够让肿瘤细胞抑制增殖,推动癌细胞的凋亡,让化疗的效果增强,并且可以让多耐药逆转。再者川芎嗪从川芎内提出,属于生物碱——也就是四甲基吡嗪。这个药物作用广泛,包括抗纤维化,拮抗钙离子,抗氧化,让微循环改善,抗血栓的形成,使小动脉扩张,抗血小板的凝聚及活血化瘀的作用等,现阶段治疗中,以各类血管性的疾病治疗为主。
1.2国内外研究现状分析
丹参(S.miltiorrhizaBunge)也可以叫做大红袍,红根及血参等,是多年生的唇形科(英文名称Lamiaceae)的鼠尾草属的植物,在2011年时学者王辉等提出,产地以河北省,山东,四川,安徽,浙江及江苏省等为主[1]。对于丹参来说,用根茎及根作为药材,味道苦,性质微寒,其功效主要包括镇静安神,消肿止痛,凉血消痈,活血调经及祛瘀生新等,故中医上素有“一味丹参,功同四物”之说(何根云等,2011)[2]。据现代研究证实,丹参能够扩张血管,增进动脉供血与供氧量,可以用来治疗心绞痛、冠心病、心动过速、心肌梗塞等病症(高天雷等,2016)[3]。目前,丹参已被制作为多种药剂,如片剂、胶囊、颗粒剂、注射剂、口服液、喷雾及滴丸等,具有极高的药用和经济价值(Kaietal.,2005)[4]。在以上药物制剂中,复方丹参滴丸是第一个通过X食品和药物管理局临床测试和二期临床试验的传统中草药药物。除此之外,复方丹参片,注射用丹参多酚酸盐、丹参酮胶囊、丹红注射液等也是使用较为广泛的药物制剂。近年来,丹参也逐渐被应用于食品和医疗保健领域,如丹参粉、丹参保健茶、腌制丹参等(殷吉磊,2016)[5]。
2 川穹药
川穹属于伞形科的蒿本植物,性温、味辛,主要功效包含疏风止痛、活血化瘀以及行气开郁。有文献中表示在川穹中,酚性成分以及总生物碱能够实现冠脉扩展,使得冠脉血流量增加,将心肌的耗氧量降低,对A D P 诱导血小板凝集进行抑制,同时能够解聚对凝集血小板,继而将血小板表面的活性降低[6]。
2.1川穹药成分
川穹化学成分相当复杂,主要分为四个大类,
2.1.1酚类和有机酸
对于川芎来说,其含有酚类及有机酸的成分多余十八种。在中草药内,芳香类属于常见的一种成分,这个成分具有抗血小板聚集和抗血栓的作用。现阶段,在研究川芎中的有机酸时,咖啡酸、阿魏酸以及绿原酸属于主要研究对象[7]。
2.1.2苯酞类化合物
这种化合物属于川芎中主要物质,呈现出苯酞的母核结构,川芎中苯酞类的化合物将近45种。经过体外实验得出,川穹中洋川芎内酯I、藁本内酯以及洋川芎内酯A可以穿过血脑的屏障,推测可以将这种芳香类的成分当做“使药”引药基础[8]。
2.1.3生物碱
川穹中生物碱主要是川芎嗪( trimethylpyrazine,TMP) ,这种成分为四甲基吡嗪酰胺类,将磷酸川芎嗪胶囊服用以后,其吸收比较快,峰值浓度到达时间仅需30min,体内分布比较广,其分布的容积在60L以上,有数据显示血浆蛋白的结合率接近64.64%,给动物口服之后,胃中浓度一般比肠中浓度高,半衰期的消除所需时间不超过3小时[9]。
2.1.4多糖类
川芎多糖的抑菌活性与其浓度并不呈现线性相关,川芎多糖浓度比较低时让小鼠服用,对于胚胎成纤维的细胞生长有促进作用,多糖实际溶解度大小与活性强度正相关,黏度则与活性强度反相关,为了保证药理活性得到充分发挥,分子量中的多糖应该适中[10]。
2.2川穹药理作用
2.2.1抗炎、镇痛
马宁宁等实验研究确定了川芎可以在抗炎功效中发挥作用的成分,包括新蛇床的内脂,Z-藁本内酯,以及洋川芎内酯A,此类有效成分利用TNF -α,IKKβ,JAK3,JAK2,JAK1,PKC,EKR2,COX-2可以有效抑制炎性信号的转录,进而干预其下游因子的表达,并有效发挥抗炎的功效[11]。
2.2.2抗血栓形成
川芎所含有的川芎嗪和阿魏酸均具有较好的抗血栓形成的作用。除了两种有效成分以外,还分离出4种有效的成分,包括川穹三萜,3,8-二羟基酰的内脂和1-H-苯并咪唑-2-胺,及新绿原酸,同时和靶蛋白内核心的氨基酸彼此间存在作用力,可以让血栓形成得到有效抑制。[12]。
2.2.3促进血管舒张
川芎内川芎嗪和阿魏酸都能够让推动血管舒张,从而推迟动脉粥样硬化出现的时间。陈志民采取高效液相色谱方法测定川穹在血管舒张方面的促进作用,研究发现川穹中阿魏酸达到2.95%时,其促进血管舒张的效果比较好,说明其促进血管舒张的有效成分为阿魏酸[13]。
2.2.4对呼吸系统的作用
实验研究表明,当淋巴细胞及蛋白激酶作为诱导介质,诱发哮喘时,能够有效抑制其活化的过程,从而使气道的炎症反应受到抑制,最终让哮喘出现得到有效抑制[14]。
2.2.5抗肿瘤
川芎的多种成分如苯酞类化合物、川芎嗪等可有效抑制癌细胞及其因子表达,起到抗肿瘤的作用[15]。
3 丹参药
丹参( Salvia miltiorrhiza Bge. ) 这种多年生的草本植物为唇形科鼠尾草属,根茎与干燥根为主要的药用部位,性寒、味苦,在我国安徽、河北以及陕西等地比较常见,功效有凉血消痈、活血祛瘀与痛经止痛等。丹参在疮疡肿痛、胸痹心痛以及心烦不敏等疾病中应用比较广泛[16]。因为丹参在心血管疾病与血液疾病中有显著作用,近年来,医药学界对丹参的研宄越来越广泛,其在临床中,已经证实了部分作用,包括降压,抗血栓,抗凝血及微循环的改善等,开发前景相当广阔。
3.1丹参药成分
对于丹参来说,其内有大量的化学成分,以两大类为主:①主要是丹参酮型二萜,属于二萜类的脂溶性的成分,②主要是粉酸,属于水溶性的成分,除此以为,还含有氮类化合物、内酯类化合物,以及多糖、黄酮、甾体、三萜等成分[17]。
3.2丹参药理作用
丹参在临床上的应用也十分广泛,它具有多种药理作用。
3.2.1心肌保护作用
细胞实验证明,以丹参酮IIA为主的丹参提取物具有一定的雌激素样作用对心血管系统作用,可知这种提取物能够当成雌激素的受体的调节剂(英文名称S E R M )来使用,可以治疗心血管的疾病及防止心肌细胞出现凋亡,并不会使病人在患乳腺癌上增加风险[18]。
3.2.2抗凝血及抗血小板聚集
我们国家的学者于二十世纪八十年代的时候,对七种同属进行了研究,不过不一样的丹参注射液,经过研究可知,均可以在抗凝血上发挥作用,原儿茶醛、丹参素以及丹参酮等丹参提取物都可以抗凝血,作用最强的是丹参酮[19]。
3.2.3抗动脉粥样硬化(A S )
对于抗动脉粥样硬化来说,其出现的原因为低密度的脂蛋白的氧化修饰。经过研究可知,丹参类水溶性的成分,也就是丹酚酸A 能够有效抑制C u 2+作为介质诱导人体血清中低密度脂蛋白的氧化[20]。
3.2.4调血脂
在部分心血管和AS的疾病中,高脂血症为危险因素之一。利用动物进行实验研究可知,丹参内提取物制作的制剂,也就是丹红注射液可以在调血脂上有显著的作用,目前在此病降血压的治疗中,已经得到广泛使用,并且还可以改善脑损伤[21]。
3.2.5抗炎
丹参及其提取物均被证实有非常好的抗炎效果。学者X u 等在研究中指出,丹参能够让NF-kB收到抑制,进而减轻来自骨关节炎的损伤
3.2.6抗肿瘤
文献报道显示,丹参多糖能够诱导L o V o 细胞凋亡,阻止细胞周期进入S 期,并提高细胞内活性氧压力,可作为天然抗癌剂应用于抗肿瘤临床研究[22]。
3.2.7抗氧化
酚羟基具有易氧化的特性,能够和过氧化物结合,发挥抗氧化的作用。并且党参内有效成分中,大部分含有酚羟基,所以丹参在抗氧化的活性方面也发挥很好的作用。
3.2.8其他作用
丹参还有许多作用,包括抗溃疡,抗HIV,和镇痛等。学者C a o 等指出,选择乙酸,福尔马林和蜂毒给药时,丹参酮IIA 能够减少出现伤害性的反应,可以让大鼠躯体及内脏减轻炎症疼痛。除此以外,此类丹参酮IIA能够利用其过氧化来调节蛋白激酶(A M P K ) /烟酰胺磷酸核糖转移酶(N a m p t ) ,进而对T a t诱导人类免疫的缺陷病毒1 型(H IV – 1 ) 抑制其反式激活。还发现丹参可加强胃黏膜屏障,促进沿溃疡边缘的胃黏膜细胞增殖,有效促进溃疡愈合和预防复发[23]。
4 丹参和川穹药在鼠体内代谢
4.1丹参鼠体内的代谢
4.1.1丹参素
鉴定了大鼠的血浆及尿液,总的有22个代谢产物,主要是丹参素原型,在体内代谢中包括去羟基化、脱水以及甲基化等。丹参素易产生结合型代谢物,特别常见的有硫酸酯和甲基的化产物,和葡萄糖的醛酸,下面是代谢的具体途径。
图1丹参素代谢途径
4.1.2丹酚酸B 的代谢途径及产物研究
Qi 等以100 mg·kg - 1 剂量通过静脉注射的方法使用丹酚酸B 以后,通过液相色谱-离子阱的飞行时间的质谱( 英文LC-IT /TOF-MS) 方式针对大鼠的血液,胆汁以及血浆之中样本进行检验。检验发现,在大鼠的胆汁之中代谢产物一共有七个,包括紫草酸,三甲基的丹酚酸B,丹酚酸A,二甲基的紫草酸,单甲基的丹酚酸B,三甲基的紫草酸等。在血浆中检测的代谢产物有五个,以丹酚酸S,单甲基的丹酚酸B,和脱水的丹酚酸S产物等为主[24]。检测尿液发现了3个代谢产物,即二甲基的丹酚酸B,单甲基的丹酚酸B和三甲基的丹酚酸B,通过分析整理可知,大鼠体内丹酚酸B的代谢产物以甲基的化产物为主。学者袁海建等通过尾静脉向SD大鼠进行丹酚酸B注射,并选择其当成研究样本,于实验期间,结合使用超高效液的相色谱加四级杆的飞行时间的质谱技术分别分析大鼠尿液,血液和胆汁内丹酚酸B的代谢产物,由检测结果可知,总的有11个代谢产物[25]。从血浆中可以检测出丹酚酸B 的脱酯水解产物及脱水产物,而丹酚酸B及其双甲基和甲基的化产物等四个则是来自尿液,丹参素、紫草酸以及紫草酸脱脂产物等五个来自胆汁,从上述分析可以看出,胆汁、血液之中丹酚酸B以五元环和酯键上的反应为主,而水解的反应以氧化反应为主,尿液以甲基化反应为主。学者袁征等通过高效液的相色谱和聚酰胺柱的方法鉴定尿液内丹酚酸B内代谢的产物,以对灌胃以后大鼠尿液内丹酚酸B的代谢产物为主,使用乙酸乙酯萃取大鼠尿液,总的鉴定分离出5个化合物,即8-氨基喹啉-2( 1H) 酮、8 羟基-3,4-二氢喹啉-2( 1H) 酮以及1H 吲哚-2 羧酸等[26]。综上,在大鼠胆汁、血浆以及尿液之中均可以测出丹酚酸B,主要经胆汁进行代谢,甲基化是代谢的主要途径,会产甲基化的产物。
4.1.3迷迭香酸的代谢途径及产物研究
学者孙士丰等选择LC-MS 的技术分析了被迷迭香酸静脉注射的大鼠粪便,胆汁,尿液及血浆,从内可知大鼠血浆和尿液内总的检测出7个代谢产物,胆汁内有6个,而葡萄糖的醛酸及甲基化的结合物是代谢产物。让大鼠通过口服的方法使用迷迭香酸,并分析了其生物样品,从研究结果可知,血浆内含有代谢产物4个,1个迷迭香酸,1个葡萄糖的醛酸,2个单甲基与葡萄糖的醛酸与迷迭香酸的结合物。从尿液内发现5个代谢产物,包括1个迷迭香酸和葡萄糖的醛酸的结合物,1个迷迭香酸的原形,1个迷迭香酸和葡萄糖的醛酸,两个迷迭香酸和葡萄糖的醛酸与单分子的甲基的结合物[27]。从大鼠胆汁内发现6个代谢产物,包括1个迷迭香酸与葡萄糖的醛酸的结合物,2个分子甲基的结合物,2个迷迭香酸和葡萄糖的醛酸,3个迷迭香酸和葡萄糖的醛酸与单分子的甲基的结合物。对于迷迭香酸的代谢产物来说,以葡萄糖的醛酸化和甲基的化产物为主。不论选择何种方式使用迷迭香酸,静脉注射,亦或是口服,于粪便内都没有检测出代谢产物。
对上面文献进行综合,迷迭香酸于体中,以胆汁,尿液及血浆的方式进行排泄,基本没有通过粪便进行排泄,对于体内的代谢途径来说,以甲基化和葡萄糖的醛酸化为主,会出现代谢产物及结合物。除此以外,迷迭香酸能够利用硫酸酯化进行代谢。
4.1.4原儿茶酸的代谢途径及产物研究
学者姜璇等结合使用多反应的监测和LC-MS /MS 的方法,并且选择二级的全扫描质谱的方法进行辅助,对大鼠灌胃后使用复方的党参滴丸,使用12小时以后,对其粪便及尿液进行分析,分析尿液和粪便内此类药物内原儿茶酸的代谢产物。经过研究可知,尿液内发现4个代谢产物,以原儿茶酸的甲基化的产物及其硫酸酯的结合物等为主,于粪便内发现原儿茶酸的二甲基的化产物[28]。
总的来说,于大鼠体内,原儿茶酸以甲基化的代谢形式为主,成为甲基化的代谢产物。除此以外,学者王宁生等在报道中指出,原儿茶酸有两种代谢方式,即甲基化代谢为香草醛,和脱羧代谢为原儿茶酚。
4.1.5 原儿茶醛的代谢途径及产物研究
Xu 等运用HPLC-ESI-MS /MS 的技术对大鼠胆汁之中、血液与尿液之中原儿茶醛进行检测,发现大鼠尿液、血浆之中代谢产物有是一个,主要包含原儿茶酸、香草醛以及原儿茶酸单葡萄糖醛酸结合物等,胆汁之中检测代谢物有九个,没有发现原儿茶醛和原儿茶酸[29]。氧化反应原儿茶醛,能够出现原儿茶酸,极易出现于肝脏组织,肠组织及肾脏素质内,对于排出途径来说,主要是尿液及导致。根据这些能够推出,原儿茶醛于身体中先通过氧化变为原儿茶酸,然后代谢方式以葡萄糖的醛酸及甲基化为主,代谢成葡萄糖的醛酸的结合物及甲基的化产物等产物。
4.1.6丹参酮I、二氢丹参酮I 的代谢途径及产物研究
戴海学等采用LC-DAD-SEI-MSn 方法对大鼠体中隐丹参酮、丹参酮I等代谢的产物进行鉴定,研究发现在大鼠机体生物转化二氢丹参酮I 和丹参酮I的值周,发现代谢产物中,有II 相4个,I 相16个,并且发现代谢途径2个,分别是:基于丹参酮原药前提下,发生呋喃环的裂解,脱氢和氧化反应等;通过丹参酮代谢,进而出现脱氢丹参酮,最后在分子的基础上,发生呋喃环的裂解,脱氢及氧化反应等[30]。于代谢产物中II 相来说,能够出现葡萄糖的醛酸及硫酸酯化结合物。学者Wang 等利用LC-ESI-MSn 的检测方法,对大鼠选择静脉注射了二氢的丹参酮I 以后得胆汁样品进行鉴定其代谢产物。从结果可知,在胆汁内的代谢产物中发现II 相2个和I 相15个[31]。
根据以上能够知道,代谢产物中I 相反应包括二氢的丹参酮I和丹参酮I,产生I 相的代谢产物,包括脱氢和羟基化等,同时也可以利用氧化反应,呋喃环的裂解及羟基化及脱氢反应来达到。
4.1.7丹参酮IIA、IIB的代谢途径及产物研究利用
LC-MS /MS 方法对静脉注射过丹参酮IIA的大鼠体内的粪便,尿液及胆汁进行检测,对丹参酮IIA于体内代谢产物进行探讨。从结果可知代谢产物有12个,其中,有7个I 相。和标准品相互比较可知,代谢产物有羟基的丹参酮IIA,丹参酮IIB以及脱氢的丹参酮IIA等,对于I 相的代谢反应来说,以羟基化与脱氢的作用为主[32]。学者Wei 等选择HPLC /IT-MSn的技术分析斑马鱼身体内代谢产物的丹参酮IIA,从研究中可知,斑马鱼身体内丹参酮IIA的代谢产物以双羟基化,单羟基化和脱氢产物为主。学者Sun 等通过HPLC /MSn 的技术对大鼠使用静脉注射丹参酮7个(包括隐丹参酮,丹参酮IIA,和丹参酮I等)以后胆汁内I相代谢产物进行了研究[33]。从结果可知,发现代谢产物总的33个,并表明丹参酮IIA的代谢以脱氢及羟基化的作用为主,而丹参酮IIB以出现羟基化的反应为主。此外,郑晓辉等在对舌下含服适量复方丹参滴丸之后,采取LC-MSn的技术进行研究,研究发现血浆之中代谢的产物以丹参酮IIB的代谢为主,从结果可知丹参酮IIB于身体中容易丢失羟甲基。对上面的文献进行综合,和丹参酮IIA代谢的途径几乎一样,以脱氢和羟基化的反应为主,进而变为脱氢的产物及羟基化的产物。而丹参酮IIB以出现羟基化的反应为主。容易丢失羟甲基。
根据文献的综述,能够知道,检测出丹参的水溶性的成分以葡萄的醛酸化的Ⅱ相及甲基化代谢反应为主,形成甲基化的代谢产物及葡萄糖的醛酸结合物,当然也会发生硫酸酯化反应,包括丹参素可以利用硫酸酯化,甲基化及原形代谢;而迷迭香酸及丹酚酸A以出现葡萄糖的醛酸化及甲基化的代谢为主;,紫草酸,原儿茶酸和丹酚酸B以出现甲基化的代谢反应为主; 原儿茶醛于体内通过氧化变为原儿茶酸,代谢期间,经过甲基化和葡萄的醛酸化;对于咖啡酸的代谢来说,途径以葡萄糖的醛酸化和硫酸酯化为主[34]。脂溶性的成分反应主要为I相代谢,包含脱氢以及呋喃环裂解等过程,并且也会出现Ⅱ相代谢,包括葡萄糖的醛酸化和硫酸酯化,如氧化及硫酸酯化等反应;而丹参酮IIA以出现脱氢作用和羟基化的反应为主;对于丹参酮IIB来说,以羟基化的代谢为主; 隐丹参酮以脱氢的代谢方法为主。
4.2川穹鼠体内的代谢
4.2.1川穹哚
通过文献的实验分析,判断体中川穹哚代谢途径如下:具体过程从图2可以看出,即川穹哚反应生成单经基川穹哚,然后反应产生单轻基川穹哚醛,最后单经基川芍哚酸。体中的代谢过程比较复杂,在甲基氧化川穹哚之后,b一咔琳环可能会产生轻化的反应,并且在机体之中川穹哚无需完成上述整个过程就可以排出。因为川穹哚极性比较大、含有轻基的生物碱,统一产生结合的反应,所得结合物极性比较大,排出比较难以,在体中大部分尚未代谢完成或是氧化结束就会排出, 这也是尿中的原型川穹哚实际含量比代谢物的含量大关键原因。综上,在体中川穹哚代谢转化比较快与极性较大,所以排出体外较为容易,这在某种程度上就会降低生物的利用率与缩短体内的保留时间。
图2川穹哚代谢途径
闫秀国等联合液质技术与体封闭肠环方法研究川穹中之中给药吸收情况与代谢,得出血浆样品中川穹成分的存在情况(表1)
表1 血浆样品中川穹成分
4.2.2川穹代谢分析
通过分析不同研究文献不难看出,血液可以将阿魏酸、3-羟基丁基苯肽以及洋川芎内酯I等成分吸收,同时基于序贯代谢阶段将代谢停止。肝门的静脉之中没有正丁基笨酞、洋川芎内酯Q以及Z-藁本内酯等成分,能够经原型吸收的方式将洋川芎内酯H吸收。
发生自由基,肠道内细菌酶,消化液及消化酶的反应,然后生物转化,当中药进去胃肠道膜的时候,有在上皮细胞内转化药物的代谢酶的可能,于中药的生物药剂内,可以让肠渗透的反应出现的机制有哪些因素。
结论
综上,丹参川芎嗪注射液,能够治疗闭塞性的脑出血,此类疾病是其注射液的适应症,包括缺血性的中风,心肌梗塞,心绞痛,冠心病引起胸闷,脑血栓及脑供血不足的症状等。近几年,人们越发关注中成药,所以药物吸收代谢逐渐引起重视。所以本次研究需要重视实验结果的分析与文献阅读,以期将结果的科学性提高。
致 谢
感谢评阅答辩的老师百忙之中抽出时间来评阅或答辩我的论文,同时本文的完成也要感谢我的论文指导教师,如果没有指导教师的悉心教导就没有这篇论文的完成,在此过程中,我被指导教师的责任心深深感动,值得我去学习和借鉴,这给我留下了深刻印象,让我感觉到不管做任何事,仔细耐心是成功的基础。还要感谢我的同学,如果没有同学的帮助,我也不会顺利完成论文,在写论文的过程中,班上同学给了我许多建议和帮助,让我的论文可以顺利完成,感谢大家对我的支持与帮助,这对我以后的道路具有深刻的教育意义。
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