Cyc与β2-MG在糖尿病肾病早期诊断中的应用价值

　　糖尿病(diabetes mellitus，DM)是一组以高血糖为特征的慢性代谢性疾病，多由遗传和环境因素共同作用引起。糖尿病肾病(Diabetic nephropathy，DN)是糖尿病最常见的微血管病变之一，是引起慢性肾脏病变以及导致终末期肾病的主要原因［1］，也是引起糖尿病患者终末期肾功能衰竭的重要原因［2］。临床表现多为高血压、蛋白尿与肾功能逐渐减退。

　　多数糖尿病肾病患者早期无明显的临床症状，诊断困难。而在早期肾脏已开始发生病理改变，若当临床检测出蛋白尿时，肾脏损伤已不可逆转。因此，早期诊断、早期鉴别、早期治疗、改善患者的机体状况是提高糖尿病肾病患者生存率的关键。[3]目前，临床多采用肌酐、尿素氮及尿白蛋白排除率（UAER）等传统检测指标，但这些传统检测指标难以判断糖尿病患者的早期肾脏损伤。如UAER易受运动、血压、尿路感染、月经以及酮体的状态等等因素的影响。肾脏活检能发现早期肾脏损伤的组织学变化，而临床症状却多不明显，且常规的肾功能检测和尿液常规多为正常[4]。

　　Cyc是一种半胱氨酸蛋白酶抑制剂，广泛存在于机体组织的有核细胞和体液内，是一种低分子量，碱性非糖化蛋白质。产生率稳定，循环中的Cyc仅通过肾小球滤过清除，不受性别、年龄、饮食及肿瘤等等因素的影响。正常情况下循环中的Cyc自由的通过肾小球滤过膜，并且在近曲小管进行重吸收和降解，而通过肾小球滤过膜的Cyc也不会返回血流中。因此，血清中的Cyc含量在一定程度上能反应肾小球滤过率，是反映早期肾功能损伤的有效指标之一［5－6］。β2-MG是一种小分子球蛋白，广泛存在于机体淋巴细胞、血小板、多形核白细胞。分子量为11800，由99个氨基酸组成的单肽多链。正常人β2-MG的合成率以及释放量较为稳定,且分子量小，不和血浆蛋白结合，99.9%被肾小球滤过在近曲小管重吸收降解，故而正常情况下机体β2-MG的排出极微量。且β2-MG含量不受性别、年龄等因素的影响，因此，血清中β2-MG含量升高可在一定程度上反应肾小球滤过功能损伤或滤过负荷增加。是反映早期肾脏功能损伤的有效指标之一［7－9］。

　　因此，本研究将糖尿病肾病患者作为研究组，通过对研究组及对照组血清中的Cyc与β2-MG含量的测定，分析对比各组检测数据。探讨血清中Cyc、β2-MG

　　与DN的关系。

　　收集2016年1月～2017年1月在南华大学附属第一医院住院以及门诊,经临床、影像学以及实验室明确诊断为DN患者60例。其中男29例，女31例，年龄为36～80岁,平均（54.1±9.9）岁。

　　另随机选择同期健康体检组60例作为健康对照组，其中男30例，女30例，年龄35～81岁，平均（54.4±9.7）岁。

　　研究组和对照组群体年龄结构、性别组成等无明显水平差异。

　　诊断标准参照1999年修订的WHO糖尿病诊断标准[10]。

　　日立7600型全自动生化分析仪，Cyc由维日康生物科技有限责任公司提供其配套试剂，β2-MG由维日康生物科技有限责任公司提供其配套试剂。

　　所有患者入院当天9:00前采集空腹静脉血4.0 mL，正常对照组在入组后均禁食10 h以上，次日采集空腹静脉血4.0mL，避免脂血和溶血。4000 rpm离心10min，取血清分别检测Cyc、β2-MG。

　　血清Cyc、β2-MG采用乳胶增强免疫透射比浊法进行检测。采用试剂说明书推荐的阳性临界值：Cyc>1.36，β2-MG>2.8mg/L判定为阳性。

　　采用SPSS 21.0软件进行统计分析，计量资料采用t检验，计数资料采用χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

　　从表1可见，糖尿病肾病患者（即研究组）血清Cyc、β2-MG的水平含量明显高于健康对照组，差异具有统计学意义（P＜0.05）。

　　表1两组Cys-C、β2-MG含量的比较（mg/L，x±s）

　　组别Cycβ2-MG

　　研究组（n=60）2.0±0.6 2.4±0.8

　　对照组（n=60）0.5±0.1 2.1±0.3

　　T值26.319 23.903

　　P值0.0000 0.0000

　　由表2可见，研究组的血清Cyc与β2-MG阳性检出率分别为为73.3%，58.3%。而联合检测血清Cyc与β2-MG的阳性率为90.0%,显著高于任一单项检测,其差异有统计学意义(P＜0.05)。

　　项目n阳性阳性率

　　Cyc 60 44 73.3%

　　β2-MG 60 35 58.3%

　　二项联合检测60 54 90.0%

　　表2两项指标单一检测与联合检测阳性率的比较

　　由表3可见，研究组中联合检测血清Cyc与β2-MG灵敏度明显高于单项检测，其差异有统计学意义（P＜0.05）；而单项检测与联合检测的特异度无统计学意义（P＞0.05）。说明该二项指标联合检测时对临床诊断糖尿病肾病有重大的参考价值。

　　表3单一检测与联合检测灵敏度与特异度的比较

　　项目n灵敏度特异度

　　Cyc 60 85.1%69.4%

　　β2-MG 60 81.5%64.3%

　　二项联合检测60 95.7%66.2%

　　糖尿病是关乎世界人民的健康问题，随着现代人们生活水平不断提高、饮食习惯发生改变，发病率亦呈上升趋势。现阶段，我国糖尿病的患病率在20岁以上年龄段为9.7%，其中男生占10.6%，女生占8.8%。推断我国糖尿病总体患病人数超过9千2百万，总数已经超过印度，成为世界上糖尿病第一大国［11］。糖尿病作为一种慢性的代谢性疾病，随着疾病的进展，不断地诱发人体其他器官结构性改变，且糖尿病肾病被认为是糖尿病严重的慢性微血管病变之一，是导致糖尿病患者死亡的主要原因之一。在我国，糖尿病肾病亦是造成终末期肾衰竭重要病因［12］。事实上，糖尿病肾病已经成为全球性慢性肾病及其所致的终末期肾病的主要原因［13］。其发病机制是随着糖尿病病情的进展，由早期的肾小球肥大到基底膜增厚、细胞外基质蓄积，进而导致肾小球滤过率降低，微量蛋白尿升高，肾水肿，肾功能进一步损伤最终发展成为不可逆的终末期肾功能衰竭，严重影响了患者的生命安全[14]。因此，对于糖尿病肾病的早期临床诊断及预防，改善患者的身体状况是提高糖尿病肾病患者生存率的关键。

　　目前，临床上对于糖尿病肾病的早期诊断多采用血清肌酐、尿素氮和尿微量白蛋白排泄率等传统检测指标，而在病变早期时，血清肌酐、尿素氮浓度均在正常范围之内，当血清肌酐与尿素氮含量开始增加时，肾小球滤过率已经下降到了正常情况的一半［15］，而且容易受性别、年龄、饮食、运动等多种因素的影响。因此，这些传统检测指标很难监测到早期的肾脏损伤。肾脏活检是诊断肾脏损伤病变的金标准，但检查在一定程度上也会带来损伤，患者难以接受且过程繁琐，不适合作为临床常规检测肾脏损伤的方法。

　　Cyc是一种半胱氨酸蛋白酶抑制剂，广泛存在于人体的有核细胞和体液中，产生率稳定，没有组织特异性。正常情况下，循环中的Cyc带正电荷，能自由地通过肾小球的滤过膜，并且在近曲小管进行重吸收降解，而通过肾小球滤过膜的Cyc也不会重新回到血液中。因此，血清中的Cyc仅由肾脏清除，同时肾小管上皮细胞不分泌Cyc，肾小球滤过率直接影响血清Cyc含量，且不受饮食、性别、年龄、肿瘤、肌肉活动、炎症反应等因素的影响［17-19］。当糖尿病合并肾脏早期损伤时，由于各种炎症刺激、生化代谢紊乱和机体免疫损伤导致肾小球的基底膜增厚，细胞外基质蓄积，肾小球滤过面积的减少，肾小球滤过率降低，使血清中的Cyc含量增加，且血清中的Cyc含量会随着疾病的加重而逐渐增加。因此，血清中的Cyc含量与肾小球滤过率有一定相关性，是反映早期肾功能损伤的有效指标之一［5－6］。

　　β2-MG是一种小分子球蛋白，由人体的淋巴细胞、血小板、多形核白细胞等恒定产生，是白细胞抗原的β轻链，分子量小，除了红细胞与胎盘滋养层细胞之外，广泛存在于人体有核细胞之中，特别是单核细胞和淋巴细胞。正常人血清β2-MG含量较稳定,不和血浆蛋白结合，易通过肾小球滤过膜，并在近曲小管上皮细胞内重吸收降解为氨基酸，不会重新回到血液中。因此正常情况下，人体β2-MG的排出量十分微量，且不受一些因素的影响。如年龄、性别。所以血清β2-MG含量可在一定程度上反应肾小球的滤过功能与肾小管的重吸收功能。当糖尿病合并肾脏功能损伤时，导致肾小球的基底膜增厚，细胞外基质的蓄积以及糖原反应的阳性物质沉积，造成肾小球滤过面积的缩减，肾小球滤过率的降低，血清中β2-MG含量升高。因而，血清β2-MG弥补了传统的肾脏检测指标中肾功能以及尿蛋白一些不足，且有利于早期诊断肾脏的损伤病变部位以及对疾病的早期诊断预防治疗有着不可估量的临床意义［20］。

　　本研究结果显示：糖尿病肾病患者血清中的Cyc浓度浓度高达2.0±0.6mg/L，显著高于正常健康人群的0.5±0.1mg/L，说明Cyc浓度增高可以作为糖尿病肾病早期诊断的重要指标。糖尿病肾病患者体内的β2-MG浓度高达2.4±0.8 mg/L，显著高于正常健康人群的2.1±0.3 mg/L，说明β2-MG浓度增高也可以作为糖尿病肾病早期诊断的重要指标。此外，二者联合检测的阳性率及灵敏度分别为90.0%、95.7%，说明二种指标联合检测更有利于提高患者的检出率。

　　综上所述，人体肾脏的代偿能力比较强大，病变早期，传统的检测指标不敏感，而在糖尿病肾病早期诊断中血清Cyc、β2-MG阳性检出率较高[21],可结合临床症状，影像学，实验室，辅助诊断早期糖尿病肾病。联合检测Cyc与β2-MG有利于肾脏疾病的早期的发现预防、诊断治疗以及对病情进展评估和病变的预后判断，大大地提高了糖尿病肾病患者的生活品质。

　　通过对血清Cyc、β2-MG的检测，发现其是糖尿病早期诊断的重要指标。联合诊断可以显著提高患者的检出率，值得临床推广应用。

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